艾滋病毒（HIV）感染引发的免疫系统损害是全球范围内重要的公共卫生问题。虽然现有抗逆转录病毒治疗（ART）能够有效抑制病毒复制、延缓疾病进展，但病毒的潜伏状态，即潜伏感染，仍然是实现HIV治愈的最大障碍。潜伏感染主要存在于静止的CD4+ T细胞内，这些细胞携带整合的病毒基因组，却处于转录沉默状态，不被免疫系统识别和清除。针对这一问题，科学家们不断探索有效激活潜伏病毒、随后清除感染细胞的方法。随着mRNA和脂质纳米颗粒（LNP）递送技术的迅猛发展，高效递送功能性mRNA到难以转染的静止T细胞成为可能，为逆转HIV潜伏提供了新的策略。传统的HIV潜伏逆转剂（LRA）如组蛋白脱乙酰酶抑制剂、多肽等，虽然能部分激活病毒转录，但常存在激活效果有限、非特异性副作用明显、无法完全消除潜伏病毒的缺陷。
此外，这些LRA不能有效克服病毒转录过程中的多重阻断，包括转录延伸、剪接等多个环节，导致潜伏病毒仍处于过程中未完成的状态。新一代策略重点提升LRAs的特异性、效能和安全性。mRNA-LNP技术以其高效递送大分子核酸、低免疫原性和可设计性成为理想载体。近年来此类技术在癌症免疫和新冠疫苗中取得突出成功，拓宽了其在病毒感染及遗传疾病治疗中的应用前景。本研究通过研发全新的LNP配方——LNP X，在无需激活前处理的静止CD4+ T细胞中成功递送编码HIV转录激活蛋白Tat的mRNA。LNP X采用了SM-102作为离子化脂质，结合β-谷甾醇替代传统胆固醇，显著增强细胞表面吸附及胞内翻译效率，达到超过传统药物载体的转染效率。
使用LNP X封装Tat mRNA后，可促进潜伏HIV启动子区域转录，显著增强病毒转录活性，成功逆转病毒潜伏。体外实验显示，在ART抑制患者的外周CD4+ T细胞上，Tat-LNP X诱导多项病毒RNA产物大量表达，包括转录起始区域（TAR）、转录延伸区（LongLTR、Pol）及剪接成熟的Tat-Rev多重剪接RNA，说明其能够完整突破病毒转录过程中多重阻碍。且该激活不伴随显著T细胞活化，减少了非特异性免疫刺激的风险。相比传统的激活剂如PMA+PHA，Tat-LNP X展现出更优的潜伏逆转效果。实验进一步证实，由Tat-LNP X诱导的病毒激活能够产生病毒RNA释放，表明具备引发病毒复制的潜力，为依赖病毒复制引导感染细胞凋亡或免疫清除创造条件。除Tat mRNA外，LNP X还可用于递送更复杂的CRISPR激活系统（CRISPRa）。
CRISPRa通过无核酸酶活性的dCas9融合转录激活因子，并借助引导RNA定位到HIV长末端重复序列（LTR）启动子，特异性激活病毒转录。研究团队成功将dCas9-VP64、MS2-p65-HSF1激活因子mRNA与多种引导RNA共同封装于LNP X中，完成对静止T细胞的转染，实现靶基因如CD25的高效激活表达。针对HIV LTR的引导RNA组合也有效激活患者来源的潜伏病毒转录，尽管转录激活水平略低于Tat-LNP X，但特异性强、副作用少，展现了CRISPRa-LNP X作为下一代高精度LRA的潜力。机制研究表明，LNP X的增强性能主要源于其卓越的细胞结合能力及提高的mRNA翻译效率，而非改善内吞后胞质释放效率。这一发现为优化LNP设计提供了新视角。高效递送、精准激活相结合，有望避开传统LRA的高毒性和非特异激活限制，实现潜伏病毒的安全有效清除。
结合实验结果可见，LNP X为静止T细胞实现无毒、无前激活的高效基因递送尚属首次，为T细胞基因治疗、免疫治疗开辟新路径。尽管Tat-LNP X诱导病毒转录效果显著，但仅依靠潜伏逆转并未观察到完整清除潜伏病毒的现象。此结果提示潜伏细胞可能表达抗凋亡蛋白，维持存活，或免疫效应不足以全面清除激活细胞。未来需联合促进靶细胞死亡的策略，或强化免疫系统识别活化感染细胞，以实现根治。此外，LNP技术具备良好的可调性，未来可载递更多唤醒剂、基因编辑工具，结合基因敲除或修饰技术，设计多重组合治疗方案。值得关注的是，LNP X在人体内的免疫原性、分布动态和生物半衰期尚需进一步研究，临床应用前需开展安全性及剂量探索。
针对T细胞的定向修饰及递送，将是提高体内特异性、减少脱靶效应的关键方向。随着精准纳米药物开发和mRNA合成技术的融合，未来有望实现定制化、专一性强的治疗载体。综合上述，利用创新LNP X载体递送mRNA编码的Tat或CRISPRa系统，实现对静止CD4+ T细胞中潜伏HIV的精准激活，引领了潜伏病毒消除的新纪元。这不仅突破了长期以来静止T细胞转染难题，也为HIV根治治疗策略提供了强大技术工具。未来结合杀灭策略及免疫动员，有望推动实现功能性或根治性HIV治愈。随着研究进展，mRNA-LNP平台将可能广泛应用于多种难治病毒性疾病及免疫紊乱，为基因治疗开辟更广阔的前景。
高效、安全、可调控的mRNA递送技术，有望助力传统疗法无法触及的细胞群体，实现精准干预，改变疾病治疗格局。
