在全球范围内，艾滋病病毒（HIV）感染仍是一个重大公共卫生挑战。尽管现代抗反转录病毒治疗（ART）能够有效抑制病毒复制，显著降低发病率和死亡率，却并未实现病毒根治。这主要归因于HIV病毒在宿主休眠CD4+ T细胞中形成的潜伏库，病毒基因组整合进细胞DNA，处于转录沉默状态，逃避免疫系统和药物的清除。停止ART后，这些潜伏病毒会重新激活，导致病毒反弹。解决潜伏病毒这一根本难题，是实现HIV治愈的关键所在。 近年来，利用迟发逆转激活剂（Latency-Reversing Agents, LRA）以诱导潜伏病毒唤醒的策略受到了广泛关注。
传统的LRAs主要通过小分子抑制剂如组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACis）等发挥作用，但其疗效受限，不能全面激活病毒转录，而且存在免疫细胞毒性和非特异性激活等不良反应。这些问题严重阻碍了LRA在临床上的推广应用，亟需开发更高效、安全及特异性的病毒激活策略。 得益于新兴的mRNA和脂质纳米颗粒（Lipid Nanoparticles, LNP）技术，为治疗潜伏HIV开辟了新的前沿领域。LNP作为一种有效的核酸递送载体，具备高效保护mRNA、促进细胞摄取及释放功能，已经在新冠疫苗等多个领域展现卓越表现。然而，休眠CD4+ T细胞的转染长期以来因其低代谢和活化状态，转染效率极低，限制了此类技术的应用。 近期，一项突破性的研究开发出一种新的LNP配方，被称为LNP X，成功实现了无须T细胞预激活的情况下，高效递送mRNA至休眠CD4+ T细胞。
通过优化脂质成分，将传统的DLin-MC3-DMA离子化脂质替换为SM-102，同时引入β-谷甾醇取代胆固醇，这种配方不仅维持了纳米颗粒的物理稳定性，还极大提升了纳米颗粒与T细胞的结合及转染效率。实验数据显示，使用LNP X制备的mRNA载体能在超过75%的休眠CD4+ T细胞中成功表达目标蛋白，且细胞存活率及活性标记未受显著影响，显示出低毒性且高效的特性。 为了验证此系统在HIV潜伏库清除的应用潜力，研究团队将编码HIV转录激活因子Tat蛋白的mRNA封装入LNP X。Tat蛋白是病毒自身关键的转录激活蛋白，通过结合到HIV的转录响应元件（TAR），极大促进病毒基因转录延伸和完成。以往直接递送Tat蛋白或其基因因转染效率低而受限，但借助LNP X递送Tat mRNA，不仅实现了潜伏病毒的有效激活，还克服了传统LRA激活初始转录而无法完成转录延伸的瓶颈。 体外实验结果表明，Tat-LNP X处理显著提升了来自抑制期HIV感染者体内CD4+ T细胞中的多个病毒转录水平，包括转录起始、延伸以及多重剪接等关键步骤，与常用的免疫激活剂（如PMA和PHA）相比，激活效果更为显著。
同时，Tat-LNP X激活过程中并未引发T细胞普遍激活，避免了由细胞全身激活带来的潜在炎症和毒副作用。此外，Tat-LNP X还能促使病毒颗粒释放，虽然暂未观察到潜伏病毒负荷的显著下降，但为后续结合免疫清除策略奠定基础。 除Tat蛋白外，研究还成功利用LNP X递送了以CRISPR激活技术为核心的新型LRA方案。该方案以失活Cas9蛋白融合转录激活域（VP64）及辅助转录激活因子（MS2-p65-HSF1）为核心，辅以特异引导RNA靶向HIVLTR启动子，实现对潜伏病毒基因的精准激活。通过优化三组RNA间的比例和共封装技术，LNP X递送的CRISPR激活系统在模型细胞和初代休眠T细胞中均能有效诱导靶标基因（如CD25）表达，证明该技术能实现复杂大分子转录因子的高效细胞内表达。 针对HIV潜伏病毒靶向的CRISPRa-LNP X系统在艾滋病感染患者体外实验中也展现出良好激活性能，显著诱导病毒多种转录本上调，且不引发T细胞非特异性激活或明显毒性，体现了极强的特异性和安全性。
然而，该系统尚未明显促进病毒颗粒释放，提示后续需要继续优化或联合其他治疗以实现清除潜伏病毒的目的。 这些研究进展标志着利用mRNA和LNP技术革新HIV潜伏治疗战略的重大突破。相比小分子药物，mRNA-LNP能实现高专一性、高效率且相对低毒的潜伏病毒激活，开辟了精准靶向和多功能组合治疗的新途径。特别是LNP X配方的成功，不仅提升了递送效率，还为递送更大、更复杂的RNA组合如CRISPR系统提供了可行方案。 展望未来，将这一技术推广至体内应用，需解决免疫原性、体内分布、递送细胞靶向性及药物代谢等问题。同时，潜伏病毒清除可能需要与宿主免疫增强剂、细胞毒素诱导剂或基因编辑协同作用，采用“激活—清除”综合策略，方能真正实现持久性病毒根治。
此外，该递送平台及其优化技术同样具备改造其他疾病免疫细胞、肿瘤免疫治疗及基因治疗的广阔前景。 总之，基于高效mRNA递送的LNP X技术，结合Tat mRNA和CRISPR激活体系，为休眠HIV病毒的唤醒及潜伏库清除带来了创新和希望。持续深化对其转染机制、生物安全和治疗效果的研究与优化，势必加速HIV治愈的临床转化，并引领下一代精准核酸疗法的研发浪潮。
