HIV的潜伏感染一直是全球抗击艾滋病的重要障碍之一。尽管现代抗逆转录病毒治疗（ART）能够有效地抑制病毒复制，控制感染者的体内病毒载量，但潜伏在静息CD4+ T细胞中的病毒，这些整合入基因组且处于转录沉默状态的病毒，仍然存在并可能在治疗停止后重新激活，导致病毒反弹。如何准确、高效地激活这些潜伏病毒，成为实现HIV根治的关键环节。 传统的潜伏逆转策略主要依赖百余种潜伏逆转剂（Latency-Reversing Agents, LRAs）通过小分子药物激活病毒转录，但这些早期LRAs存在激活效率低、非特异性副作用显著等问题，并未取得理想的临床效果。尤其是，许多LRAs只能诱导HIV转录起始，难以克服转录延伸、剪接等多层阻滞，无法实现完整病毒的表达和清除。此外，这些非特异性LRAs可能抑制免疫细胞，阻碍机体对感染细胞的清除。
近几年，mRNA技术的兴起为HIV潜伏逆转提供了新的方向。通过脂质纳米颗粒（Lipid Nanoparticles, LNP）传递编码特定蛋白的mRNA，可以实现针对性高效的基因表达，继而调控细胞内病毒转录。本文重点介绍一种新型LNP配方“LNP X”，该配方实现了对难以转染的静息CD4+ T细胞的高效mRNA递送，且无毒性、无激活细胞效应，极大提升了潜伏病毒逆转的可能性。 LNP X的创新之处在于其采用了SM-102这类优异的阳离子脂质，提高了内吞体逃逸能力，同时利用β-谷甾醇替代传统胆固醇组分以增强细胞表面的结合，提升传递效率。研究显示，LNP X能够在未经过预激活的静息T细胞中实现超过75%的转染效率，而传统的同类LNP系统仅有不到3%的效率。更令人鼓舞的是，LNP X在转染过程中未引起细胞的非特异性激活或毒性，保证了潜伏病毒激活的专一性和安全性。
以HIV转录激活蛋白Tat为例，其能够结合病毒转录启动子上的TAR元件，增强转录延伸效率，破解潜伏病毒的转录阻碍。研究团队利用LNP X递送编码HIV Tat蛋白的mRNA（Tat-LNP X），在J-Lat细胞系和来自抑制性ART患者的原代静息CD4+ T细胞中均实现了强劲的病毒转录激活。细胞水平的HIV RNA各个环节—转录起始、延伸、剪接及完整转录—均显著上升，产生了可检测到的病毒颗粒释放，且超出了传统强效激活剂如PMA/PHA的反应强度。特别值得一提的是，Tat-LNP X激活病毒转录时并未引起T细胞表面激活标志物表达，避免了非特异性的免疫激活风险，这在潜伏逆转治疗中是一大优势。 除了tat蛋白编码mRNA外，研究还展示了通过LNP X协同递送CRISPR激活系统的可能性。基于无活性Cas9（dCas9）结合多个转录激活因子融合体的CRISPRa系统，能够精确定点激活宿主或病毒基因。
利用LNP X共封装dCas9-VP64、MS2-p65-HSF1和导向HIV LTR启动子序列的gRNA，成功诱导潜伏病毒的特异性转录激活。同时，通过敲低或激活宿主基因如IL2RA（CD25）的表达，展示了系统在调控免疫细胞功能和耐受性的广阔应用前景。 这项技术的另一大亮点是无需对T细胞进行预激活。以往传统基因递送手段如电穿孔、大多数病毒载体递送，都需要激活T细胞以提高转染效率，而激活本身会改变细胞状态、影响实验结果及临床安全性。LNP X的非激活、高效率转染特点，使其极为适合于潜伏病毒激活等精细调控型基因治疗领域。 LNP X的成功不仅在于物理化学优化，更在于分子机制的深刻理解。
研究指出，ß-谷甾醇增强LNP与细胞的初期结合和内吞量，而SM-102的优良性质促进mRNA的细胞质逃逸和翻译速率。结果表明，LNP X在mRNA递送后翻译效率相较传统LNP提高了数倍，确保了在低剂量下也能实现强效蛋白表达。此复合效应带来了对静息T细胞前所未有的转染可能，成为推动免疫基因治疗的新利器。 目前，Tat-LNP X强劲的潜伏逆转效果尚未显著减少稳态下的病毒DNA负荷，提示单一潜伏逆转策略难以根除潜伏库。结合潜伏逆转与免疫系统激活或细胞凋亡诱导的“冲击并杀死”联合疗法，将成为未来探索重点。mRNA-LNP技术亦为联合递送多种治疗分子提供了平台支持，可以靶向病毒、改善免疫状态及诱导感染细胞清除，实现多维度协同治疗。
未来研究方向将着眼于LNP X的体内递送效率与安全性分析。如何通过修饰或载体优化，实现高效的T细胞靶向或组织选择性分布，是转向临床应用的重要课题。同时，深入评估mRNA递送系统对免疫激活和长期基因表达动态的影响，将为安全性评估及剂量设计提供依据。利用该技术递送CRISPR相关基因编辑分子，更有望实现对潜伏病毒DNA的精准切除，开辟功能性治愈的新路径。 综上，基于LNP X的mRNA递送技术为逆转HIV潜伏病毒提供了强有力的工具。它突破了传统潜伏逆转剂疗效与安全性的限制，实现了非激活状态下对静息CD4+ T细胞的高效转染，激活了多层转录阻滞，为HIV根治策略注入了新的活力。
随着进一步的临床前和临床研究推进，这一创新平台有望催生一代更安全有效的HIV基因治疗药物，终结病毒长期潜伏的难题。相信在不远的将来，借助mRNA-LNP技术的持续创新，治愈HIV感染的梦想将愈发清晰且可及。
