获得HIV治愈的最大障碍之一在于病毒在静息CD4+ T细胞中形成了潜伏期，这些细胞携带了整合进基因组但处于转录沉默状态的病毒，令传统抗逆转录病毒治疗（ART）无法清除感染源。潜伏病毒在治疗期间虽无活性复制，却有复燃传播的风险，因此找到能够激活这些静息细胞内潜伏病毒的策略备受关注。最新的研究聚焦于通过mRNA和脂质纳米颗粒的组合，将HIV转录激活剂精准递送到静息T细胞内，打通病毒沉默状态，潜在实现病毒根除。mRNA技术作为近年来的生物医药革命，凭借其高效编码蛋白表达、可控性和良好安全性，迅速应用于疫苗和基因治疗。将mRNA封装在脂质纳米颗粒中不仅保护了其免受体内酶解，同时保障了细胞目标递送和胞内释药。相较传统的基因递送方法，这种非病毒载体方式极大地降低了免疫排斥和毒副作用的风险。
在静息CD4+ T细胞中进行有效的mRNA递送一直是技术难点，因其天然的低代谢状态和基因表达水平不活跃，令传统LNP载体的转染效率极低。通过采用新型LNP配方（LNP X），研究人员成功突破了这一瓶颈，提升了mRNA递送效率，实现了无需事先激活的细胞转染。该配方利用了SM-102作为离子化脂质，并引入了β-谷甾醇替代传统胆固醇，显著增强了纳米颗粒与静息T细胞的细胞膜结合及胞内表达水平。值得注意的是，超高的转染效率并非单纯依赖于内体逃逸能力的增强，而是体现在更高的胞浆mRNA翻译效率，这为实现高效基因表达提供了新的思路。该技术被应用于递送表达HIV Tat蛋白的mRNA，Tat蛋白作为HIV转录的重要激活因子，能特异性结合HIV基因组长末端重复序列（LTR）上的转录激活响应元件（TAR），促进转录延伸和病毒RNA产量。实验结果表明，LNP X包封的Tat mRNA能在体外显著增强静息CD4+ T细胞中的HIV转录水平，超越传统激活方法如PMA/PHA等非特异性刺激剂。
更重要的是，Tat-LNP X的应用没有引发细胞激活或毒性反应，有望避免不良免疫激活。这不仅表明该策略具备高度特异性和安全性，还为临床潜伏清除方案提供了新契机。此外，LNP X能够联合递送复杂的CRISPR激活系统（CRISPRa），实现对病毒及宿主基因的精准转录调控。通过封装死Cas9融合转录激活子及双重转录激活因子的mRNA和定制导向RNA，将CRISPRa系统高效引入静息T细胞，显著激活HIV基因的转录。这种策略不同于广谱的化学激活剂，兼具更强的靶向性与减少免疫细胞功能抑制风险，有望构建下一代高度选择性的潜伏激活剂。尽管CRISPRa-LNP的潜力巨大，当前实验显示其激活效果尚不及Tat-LNP显著，且尚未观察到病毒颗粒释放。
这意味着尚需优化递送效率、成分剂量比例及反应时效，以达到理想的潜伏清除效果。研究中亦发现单次Tat-LNP X治疗虽然大幅诱导病毒转录，尚未导致潜伏感染细胞数量明显减少，提示潜伏病毒携带细胞可能具备抗凋亡优势或耐受病毒细胞毒性。未来，联合传统杀伤疗法或者激活-清除新策略（shock and kill）将是必经之路。此外，考虑到临床转化需求，LNP X的安全性和免疫原性亦成为重点探索方向。历史数据表明，类似脂质纳米颗粒在体内递送mRNA应用于疫苗及基因治疗领域具有良好的耐受性，但针对静息T细胞的递送仍需专门评估。通过改进纳米颗粒表面配体，实现对特定T细胞亚群的主动靶向，也能进一步提升疗效并降低系统性暴露风险。
mRNA结合LNP技术凭借其灵活的构建平台优势，可迅速调整病毒靶点、更新基因编辑工具，多元化RNA载体可协同发挥，展现出强大的临床开发潜力。透过重复给药策略，维持有效表达及潜伏病毒的持续激活，有望打破病毒沉默屏障，助力消除长期潜伏库。纵观当前HIV潜伏激活领域，第一次和第二代激活剂往往由于靶标泛化及免疫调节副作用限制了疗效。LNP X与mRNA组合的创新递送方式，不仅提高了激活效率，也大幅降低了非特异性免疫细胞激活及毒性副反应，体现了未来HIV治愈策略的技术趋势。总结而言，融合mRNA和脂质纳米颗粒技术的高效递送体系正逐步推动HIV潜伏清除走向精准、高效、安全的新纪元。从基础转染到临床前潜伏激活，再到CRISPR基因调控，LNP X的广泛适用性及优越性能令人充满期待。
伴随着进一步体内评估和临床研究的推进，这一创新平台将有望成为HIV乃至更多免疫难治疾病治疗的重要基石，为实现功能性治愈甚至根治奠定坚实基础。
