艾滋病毒感染至今仍是全球公共卫生领域的重要挑战之一，尤其是病毒在宿主体内潜伏状态的存在，使根治变得极其困难。尽管抗逆转录病毒治疗（ART）能够有效抑制病毒复制，将血浆病毒载量降低至不可检测水平，但它无法根除体内潜伏的病毒库。这些病毒库主要存在于静息的CD4+ T细胞中，处于转录沉默状态，一旦治疗中断，潜伏病毒可能重新激活引发病毒反弹。如何高效、安全地唤醒这些潜伏病毒成为当前艾滋病毒根治研究的核心难题。近年来，mRNA和脂质纳米颗粒（LNP）技术的迅速发展，为基因治疗和疫苗接种带来了革命性的突破，也为艾滋病毒潜伏逆转提供了新的解决思路。研究人员提出利用LNP递送mRNA编码艾滋病毒转录激活蛋白Tat，直接促进病毒潜伏细胞中艾滋病毒的转录激活，从而实现靶向潜伏病毒的功能性清除。
传统的潜伏激活剂（LRAs）多为非特异性小分子化合物，存在活化效应有限、细胞激活和副作用明显等不足，难以实现有效减少病毒库大小。相比之下，mRNA-LNP技术不仅提高了递送效率，还能实现高度特异性的病毒激活，同时最大程度降低对宿主细胞的非特异性激活和毒性。研究团队设计了一种创新型LNP配方，称为LNP X，其独特的脂质组合包括SM-102作为离子化脂质以及β-谷甾醇替代传统胆固醇。这一配方显著提高了LNP与静息CD4+ T细胞的结合和摄取效率，同时在胞质内促进更高效的mRNA翻译，达到突破此前非激活状态T细胞难以转染的瓶颈。经验证，LNP X不依赖于细胞预激活，可直接在静息状态的CD4+ T细胞中实现超过75%的转染效率，且几乎无明显细胞毒性。这一优势为艾滋病毒潜伏细胞的精准编辑和激活奠定了技术基础。
科学家将编码72氨基酸HIV Tat蛋白的mRNA装载进LNP X，成功实现对潜伏艾滋病毒的强效激活。在体外J-Lat细胞系模型和源自感染者的静息CD4+ T细胞中，Tat-LNP X诱导了病毒启动子区域（LTR）驱动的基因表达，显著提升了漫长转录、剪接及完成转录的多个阶段，甚至在不触发T细胞全面激活的情况下，实现了病毒转录产品的释放。与传统的PMA/PHA激活组相比，Tat-LNP X表现出更强的潜伏逆转能力，表明其既具特异性又有效。此外，LNP X还被成功用于递送复杂的CRISPR激活（CRISPRa）系统，包括dCas9-VP64融合蛋白、转录激活因子和特异性引导RNA。此系统能够靶向促进宿主细胞内艾滋病毒LTR序列特异转录激活，极大地降低对宿主基因非特异性激活的风险。研究显示，CRISPRa-LNP X在J-Lat细胞系及静息初代CD4+ T细胞中均能有效诱导靶基因表达，包括内源性CD25表达的上调，且细胞存活率和活化状态未受显著影响。
尽管相比Tat mRNA的激活效力略逊一筹，但作为精准编辑工具，CRISPRa展示了独特的潜力与灵活性。具体到实用性，LNP X技术体现出现阶段基因疗法中对难以转染细胞的突破性贡献。不同于传统的病毒载体或电穿孔技术，LNP递送系统减小了细胞损伤并简化了操作流程。这一非病毒递送平台携带mRNA，既能避免外源DNA整合的潜在风险，也因mRNA具有天然的短暂表达特点，其毋需担忧遗传组的永久改动。除此之外，LNP X中β-谷甾醇的应用优化了纳米颗粒的物理化学性质，有助于增强细胞摄取及胞质释放，实现更高效率的基因表达。该配方不仅在T细胞展现出卓越性能，也为针对其他难以转染的细胞类型开辟了新路径。
科研过程中，LNP X的安全性和靶向性仍在持续强化。数据显示，LNP X在未引起T细胞过度活化的同时，不产生可检测的细胞毒性，为未来临床应用奠定信心。然而，全面评估其体内免疫原性、药代动力学及组织分布等仍是下一步必需的工作。为实现临床转化，研究者期待通过调整脂质成分、表面修饰及给药途径等手段，针对T细胞进行更精准的递送，减少非靶向细胞摄取，从而提升治疗的特异性和安全性。在艾滋病毒研究领域，潜伏激活联合后续的杀伤策略是“激活并清除”方法的核心。Tat mRNA的递送通过直接增强病毒转录延伸，克服了传统LRA仅激发起始转录却无法完成病毒激活的局限。
尽管激活后的病毒诱导免疫清除依然面临挑战，尤其是潜伏细胞具备多种抗凋亡机制，但mRNA-LNP技术为联合其它治疗手段打造平台提供可能，如促使表达病毒抗原的潜伏细胞更易被免疫系统识别清除，或者结合BCL-2抑制剂逆转细胞抗性。未来展望方面，mRNA-LNP平台的灵活性不仅适用于潜伏逆转，同样具备递送CRISPR-Cas9进行基因编辑的潜力，朝着切除整合病毒DNA迈进。结合高效递送的潜伏逆转和基因敲除，联合免疫辅助疗法，或为彻底清除艾滋病毒储库提供可行方案。总之，基于LNP X的mRNA递送技术代表了艾滋病毒根治策略中的一场技术革命。它突破了静息T细胞难以转染的技术瓶颈，实现了高效、低毒、靶向病毒的潜伏激活。这不仅拓宽了现有的潜伏逆转剂选项，也为未来基于基因编辑的综合治疗铺平道路。
在全球艾滋病毒流行仍未根除的时代，创新性的mRNA递送平台为实现功能性治愈带来希望，新技术的不断完善和临床转化将深刻改变人类应对HIV的方式。
