艾滋病毒（HIV）在人类免疫系统中构建了复杂的潜伏储库，特别是在静止的CD4+ T细胞中形成的整合前病毒成为治愈HIV的重大障碍。尽管抗逆转录病毒治疗（ART）有效抑制了病毒复制，但其并不能根除潜伏病毒，休眠的病毒可以在停药后迅速激活，导致病毒反弹。近年来，科学家不断寻求能够特异性激活潜伏病毒，从而实现“激活并消除”（shock and kill）策略的潜伏逆转剂（LRAs）。然而传统的小分子LRAs往往存在效率低、非特异性和毒副作用等问题，亟需开发更精准高效的新型策略。脂质纳米颗粒（LNP）携带信使RNA（mRNA）的技术被誉为基因治疗和疫苗领域的革命，尤其在新冠疫情期间mRNA疫苗的成功使其应用前景更加光明。最新研究通过改良LNP配方，成功实现了高效向未激活的休眠CD4+ T细胞递送mRNA，为HIV潜伏逆转提供了全新途径。
传统LNP如patisiran类制剂向静止T细胞传递mRNA的效率极低，且需要T细胞预激活以提升转染率，这不仅增加细胞应激和毒性风险，也不利于实际疗法的推广。研究团队研发的LNP X配方基于SM-102阳离子脂质替代传统MC3，并引入β-谷甾醇替代胆固醇，这种独特组合极大提升了LNP与非激活T细胞的结合能力及细胞内mRNA释放效率。实验数据显示，使用LNP X递送编码荧光蛋白mRNA，休眠CD4+ T细胞的转染率可达76%以上，且细胞活力无明显下降，突破了过去的转染瓶颈。此外，LNP X可以同时传递较大且复杂的mRNA组合，如CRISPR-Cas9激活系统。该技术能够以较低的毒性激活针对HIV长末端重复序列（LTR）特异的转录，从而诱导病毒表达。HIV Tat蛋白作为病毒转录的关键激活因子，科学家将其编码mRNA封装于LNP X中，成功在实验室模型和患者来源休眠CD4+ T细胞中诱导了强烈的HIV基因转录激活。
Tat-LNP X表现出超越传统激活方案（如PMA/PHA）的潜伏逆转能力，并且不会触发广泛的T细胞激活和炎症反应，有望减少副作用和免疫耗竭风险。利用数字PCR技术监测多种HIV转录阻断阶段，发现Tat-LNP X能够全面克服从转录启动到RNA剪接的多重障碍，促进成熟病毒RNA合成和病毒颗粒释放。然而，尽管Tat-LNP X显著提升病毒转录，但未在短期内导致整合病毒DNA数量的显著减少，提示需要与杀伤效应增强或促凋亡药物联合使用，实现潜伏细胞真正清除。CRISPR激活（CRISPRa）技术通过利用去切割活性的Cas9蛋白结合转录激活模块，实现对特定基因的精确激活。针对HIV LTR区域设计的向导RNA与LNP X结合递送，能够特异性诱导潜伏病毒转录，减小对宿主基因表达的影响。实验中，以LNP X递送组合dCas9-VP64、MS2-p65-HSF1激活蛋白及特定引导RNA，在患者CD4+ T细胞中诱导了HIV转录，但激活强度稍逊于Tat-LNP X，且未观察到毒性和非特异激活。
进一步优化CRISPRa递送方案和引导RNA设计，有望提升其临床应用前景。LNP X的制备采用精准的纳米流控混合技术，确保粒径均一、载药效率高且可重复性良好。其粒径大小适合细胞摄取，且表面组分优化助力于细胞膜结合和内吞过程。机制研究显示，LNP X的优势部分源于增强的细胞表面结合和胞内mRNA翻译效率，而非单纯提升内体逃逸能力，揭示了mRNA治疗载体设计的新思路。此项技术不仅对HIV潜伏逆转意义深远，也为免疫治疗、基因编辑及疫苗输送开辟新路径。未来，结合针对性的免疫清除策略、细胞特异性靶向改造及长期体内安全性评估，将推动mRNA-LNP基因疗法实现临床应用。
全面的多组学分析亦可帮助评估潜伏细胞中的转录及代谢变化，揭示潜伏逆转后病毒清除的瓶颈。总体而言，创新的LNP X递送系统实现了对休眠T细胞的高效非激活性mRNA传递，突破了传统LNP载体的局限。Tat蛋白和CRISPRa激活剂的成功应用印证了该平台激活潜伏HIV的巨大潜力，为研发高效低毒的新一代HIV治疗方案奠定基础。展望未来，基于mRNA-LNP的精准基因调控将成为复杂疾病治疗的有力武器，加速实现HIV功能性治愈乃至根治的目标。
