获得HIV功能性治愈的最大障碍之一是潜伏在静息CD4+ T细胞中的整合病毒。这些病毒进入休眠状态，不表达病毒蛋白，导致传统抗逆转录病毒治疗（ART）无法清除感染细胞，病毒有复活并导致病情反弹的风险。当前的治疗手段虽能抑制病毒复制，却难以根除这部分潜伏病毒，亟需新颖策略来激活潜伏病毒，使其暴露并被免疫系统或病毒自身毒性清除。mRNA递送技术近年来取得重大进展，尤其是脂质纳米颗粒（LNP）载体的成功应用，为基因治疗和疫苗设计提供了有效途径。通过LNP递送，mRNA能迅速进入细胞质，被翻译为目标蛋白，调节细胞功能。最新研究开发出一种优化配方的脂质纳米颗粒（LNP X），能以高效且低毒性的方式递送mRNA至静息CD4+ T细胞，突破了传统基因递送系统对非活化T细胞的转染低效难题。
LNP X采用SM-102为离子化脂质，辅以β-谷甾醇作为胆固醇替代物，增强颗粒与细胞结合及细胞内转译效率，而非单纯依赖内吞体逃逸的提升。实验数据表明，LNP X在未经细胞预刺激条件下即可实现超过75%静息CD4+ T细胞的高效mRNA传递，且未检测到显著细胞活化或毒性。此外，该载体兼具较好细胞特异性，能有效递送多种RNA分子，包括相对较大的CRISPRa（催化失活Cas9和转录激活复合体组成）系统所需的多组分mRNA和gRNA。针对HIV潜伏病毒的激活，研究团队利用LNP X递送编码HIV转录激活蛋白Tat的mRNA，Tat蛋白能够增强病毒LTR区域的转录延伸过程，有效逆转病毒潜伏状态。与传统非特异性刺激物相比，Tat-LNP X在体外和来自服用ART患者的外周CD4+ T细胞中诱导了更强烈的病毒基因表达，且无全身性T细胞活化，从而减少副作用风险。单剂量Tat-LNP X即可显著提升不同阶段的HIV RNA转录，包括多重剪接的Tat-Rev RNA，促使病毒核心蛋白表达及病毒颗粒释放。
尽管病毒表达显著增强，但单独Tat的激活尚不足以诱发潜伏感染细胞的有效清除，凸显出潜伏细胞抗凋亡机制的复杂性，未来需结合其他基因编辑或免疫治疗方法协同作用。除Tat外，LNP X还能递送CRISPRa系统，靶向激活HIV LTR启动子区域以实现精准的潜伏病毒转录复苏。该系统通过设计多种针对LTR序列的导向RNA（gRNA），结合dCas9-VP64和辅助转录激活因子，能够增加靶基因表达，减少脱靶效应。体外实验表明，CRISPRa-LNP X在静息CD4+ T细胞内成功诱导HIV基因表达多个阶段的转录，且细胞活性与健康状态未受显著影响。这种特异性更强的激活策略，为未来发展靶向性高、免疫副作用低的新型潜伏期逆转剂提供了有效思路。mRNA-LNP技术相较于传统小分子潜伏期逆转剂具备独特优势，尤其是在转染难以激活的静息T细胞方面。
它避免了小分子药物的非特异性细胞激活与免疫抑制问题，同时能实现蛋白表达的可控和靶点特异性强，使治疗更安全、更精准。此外，mRNA的天然短暂表达特性降低长期遗传风险，更利于临床应用推广。LNP X所用脂质成分均为临床验证过的安全材料，极大提高了未来转化为实际治疗的可能性。但仍需进一步开展体内动物模型试验，评估该新型递送系统在全身给药中的免疫原性、生物分布及药代动力学特征。制定精准的给药策略，优化剂量与给药间隔，是保证治疗效果和安全性的关键。未来方向中，利用配体修饰的LNP实现T细胞特异性靶向递送，将进一步提升治疗效率并降低非靶向细胞的影响。
此外，联合应用mRNA递送的Tat或CRISPRa与免疫增强剂，如杀伤性T细胞特异化激活或BCL-2抑制剂等，将有望促进潜伏感染细胞的清除与患者免疫系统的重塑。科研人员还可探索将其他功能性RNA（如siRNA、miRNA）或基因编辑工具整合至LNP平台，实现多层次靶向调控，为HIV治愈策略注入更多创新活力。革新的mRNA-LNP技术不仅为HIV潜伏期逆转提供了崭新平台，也为艾滋病以外的免疫系统相关疾病、肿瘤免疫治疗及基因治疗奠定了基础。对静息免疫细胞高效、低毒的mRNA递送突破，标志着基因药物进入更广泛和精准的临床应用阶段。随着生产工艺标准化和安全性验证推进，未来mRNA载体有望成为功能性治愈甚至根治复杂病毒感染的关键工具。综合来看，基于β-谷甾醇修饰的SM-102脂质纳米颗粒LNP X，成功实现了静息CD4+ T细胞高效转染，推动了Tat蛋白和CRISPRa等mRNA治疗策略的可行性，显著提升了HIV潜伏病毒的激活能力。
这种创新递送系统为实现HIV功能性治愈提供了重要技术支撑，开启了沉睡病毒精准唤醒与清除的新纪元。未来拓展其体内靶向性及联合清除手段，将有望克服潜伏期根治的瓶颈，推动艾滋病治疗迈向根本突破。
