艾滋病病毒（HIV）的潜伏感染长期以来一直是阻碍治愈HIV感染的重要难题。静息的CD4+ T细胞内隐藏着整合的HIV病毒基因组，这些病毒处于转录沉默、无活性的潜伏状态，令抗逆转录病毒治疗（ART）无法清除病毒。随着病毒的潜伏，HIV感染者即使接受严格的ART治疗，体内依旧藏有能够反复激活产生病毒的潜伏库。因此，开发能够特异性激活潜伏病毒、同时避免全身免疫过度激活的新型疗法势在必行。近年来，基于信使RNA（mRNA）递送的技术因其灵活性和精确调控能力逐渐成为突破传统疗法瓶颈的关键。本文将深入探讨一种创新的mRNA脂质纳米颗粒（LNP）递送系统，如何高效运输遗传物质至静息T细胞，从而有效逆转HIV潜伏状态，为病毒根除策略开辟新路径。
HIV潜伏感染的难题及传统挑战 HIV潜伏库主要存在于静息的CD4+ T细胞中，这些细胞中的病毒基因组长期处于关闭状态，既不产生病毒蛋白，也不引发细胞死亡。传统抗逆转录病毒疗法可抑制活跃病毒复制，却无力清除潜伏病毒。早期的潜伏逆转剂（LRA）通常为小分子化合物，如组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）等，这类药物能部分唤醒沉默病毒，但其激活效率有限且往往伴随广泛的非特异性免疫激活，影响CD8+ T细胞和自然杀伤细胞的效能，阻碍清除感染细胞。此外，部分LRA仅能启动病毒转录却难以克服转录延伸及剪接的阻碍，令病毒无法顺利表达完整的基因产物，限制了其临床应用价值。基于这些挑战，亟需开发高效、特异且低毒的新型LRA策略，能够直接且充分激活静息T细胞内的潜伏HIV。 创新mRNA-LNP技术实现静息T细胞的精准递送 mRNA疗法近年来因新冠疫苗的成功应用而受到极大关注，LNP作为mRNA的高效载体，其成分及结构设计直接影响递送效率。
本文所介绍的全新LNP配方（称为LNP X），通过替换传统离子化脂质MC3为SM-102，并以β-谷甾醇替代胆固醇，其卓越性能在无须预先激活T细胞的条件下，即可使静息CD4+ T细胞成功转染，并且细胞毒性和免疫激活极低。这种革新性的LNP设计不仅提升了细胞表面结合力和细胞内结合染色效率，还显著提高mRNA在细胞内的翻译效率，远超传统纳米颗粒技术，成为在静息免疫细胞中实现高效基因表达的新利器。 利用mRNA表达HIV蛋白Tat，实现潜伏逆转 HIV Tat蛋白是HIV病毒转录的重要调控因子，能够结合病毒转录启动子上的TAR结构，提高转录延伸效率，打破静息病毒转录停滞的瓶颈。通过LNP X递送编码Tat蛋白的mRNA，研究团队在体外和来自抑制治疗患者的外周血CD4+ T细胞中均观察到显著的潜伏病毒逆转效果。这种方法不仅激活了病毒转录的各个阶段，包括转录起始、延伸、剪接等，而且诱导产生病毒RNA及病毒蛋白，显示出强大的抗病毒反应潜力。更重要的是，Tat-mRNA的表达并未引发T细胞非特异性激活或明显毒性，避免了传统LRA带来的安全隐患。
此项突破为病毒精准激活与清除提供了技术基础。 CRISPR激活系统与LNP X协同实现基因调控 继mRNA单一基因递送后，研究进一步开发了更为复杂的基因编辑及调控工具CRISPR激活系统（CRISPRa）。该系统采用不具切割功能的Cas9蛋白，辅以转录激活域，可精准激活靶基因表达。搭配特定引导RNA，CRISPRa-LNP X能高效递送至静息T细胞，诱导内源基因如CD25的表达，验证了该平台对复杂基因组操作的可行性。针对HIV，研究设计了多条靶向LTR启动子区域的gRNA，利用CRISPRa-LNP X实现潜伏病毒的精准激活，且激活特异性高，细胞存活率和免疫激活保持良好，显示了该策略成为下一代引发潜伏病毒清除的工具的巨大潜力。 研究挑战与未来方向 虽然LNP X当前在体外展示了高效及安全的潜伏逆转优势，但仍需进一步探讨其在体内的药代动力学、安全性及免疫原性。
未来研究将集中于优化LNP X的靶向性，减少对非靶向细胞的摄取，可能通过配体修饰实现更精准的T细胞递送。此外，结合LNP X递送的Tat或CRISPRa与免疫增强剂、细胞毒性药物或免疫细胞治疗的联合策略，有望突破当前单一激活无法引起潜伏细胞清除的瓶颈，加速功能性治愈的实现。值得关注的是，单细胞研究和极限稀释测定等更精细的方法需要验证此策略是否能激活所有潜伏病毒群体中的深度沉默部分。 结语 总结而言，基于先进的mRNA-LNP递送技术，特别是LNP X的新型配方，为HIV潜伏逆转提供了一种高效、低毒且特异的解决方案。通过表达病毒关键激活因子Tat以及递送精准编辑调控的CRISPRa组合，展现了强大潜力打破病毒潜伏状态，实现潜伏库可控激活。该技术的成功不仅开创了治疗HIV的新纪元，更为T细胞相关疾病的基因治疗和免疫治疗奠定了坚实基础。
随着临床前及临床评估的推进，期待这种创新mRNA递送系统能为全球数千万HIV感染者带来治愈的曙光。
