HIV感染的根本挑战之一在于病毒在患者体内形成的潜伏储 reservoir，尤其是整合于静息CD4+ T细胞中的复制能力完整的病毒基因组。这些细胞处于转录沉默状态，传统抗逆转录病毒治疗（ART）无法清除，使得病毒在治疗中断后迅速反弹，成为实现根治的最大障碍。针对这一难题，科学界一直寻求有效的潜伏逆转策略（Latency Reversing Agents, LRAs），通过重新激活潜伏病毒，使之暴露于宿主免疫系统清除或病毒介导的细胞凋亡机制之下。然而，以小分子化合物为代表的第一代LRAs在临床试验中未能显著缩小病毒库，暴露出活性不足和非特异性作用导致免疫功能受损等问题。最近，mRNA和脂质纳米颗粒（Lipid Nanoparticles, LNP）技术的突破为开发更为精准、高效且低毒的治疗手段提供了可能。mRNA-LNP技术因其在COVID-19疫苗中的成功应用而广受关注，同时也被视为一种灵活的基因治疗工具，尤其适合递送敏感且难以转染的细胞类型如静息T细胞。
最新研究开发出一款名为LNP X的创新脂质纳米颗粒配方，利用改良的离子化脂质SM-102及天然植物甾醇β-谷甾醇替代传统胆固醇，显著提升了mRNA向静息CD4+ T细胞的传递效率。该体系不仅实现了超过75%的无毒转染效率，且无需先行激活T细胞，颠覆了以往中激活状态是转染先决条件的认知。研究表明，LNP X的高效作用部分源于其增强的细胞结合性和胞质内mRNA翻译效率，而非单纯依赖于内吞体逃逸能力的提升。基于这种强大的mRNA递送载体，科学家包裹了编码HIV特异性转录激活蛋白Tat的mRNA，成功激活了体外人源静息CD4+ T细胞中的HIV转录。Tat蛋白通过绑定病毒RNA的转录激活反应元件（TAR），显著提高了转录延伸的效率，突破了潜伏病毒转录的多个阻碍。经LNP X递送Tat mRNA的处理，患者外周血CD4+ T细胞中各阶段的HIV转录产物，包括启动、延伸、拼接均见显著提升，且抑制病毒潜伏的语境下极少诱导细胞活化标志，保证了治疗过程的安全性。
更有意义的是，Tat-LNP X的活性超越了传统的T细胞激活剂（如PMA/PHA）所带来的转录反应，展现了强大的潜伏逆转能力。与此同时，LNP X还成功递送了更为复杂的CRISPR激活系统（CRISPRa），这是一种基于dCas9融合转录激活域的RNA工具，利用特异性设计的导向RNA定位病毒LTR区，实现精准且持久的潜伏病毒激活。CRISPRa-LNP X在静息T细胞中引起了目标基因CD25的有效表达，证明其广泛适用性。针对HIV LTR的CRISPRa-LNP X经体外试验后，刺激了病毒转录的多个步骤，虽然活性略逊于Tat-LNP X，但展示了极佳的特异性和低毒性优势，为未来精准编辑技术治疗HIV提供了坚实基础。值得关注的是，尽管潜伏被唤醒，但病毒相关的细胞死亡未得到明显增强，这提示潜伏逆转可能需联合促使感染细胞死亡或免疫清除的策略共同实施。随着这项技术的成熟，未来还需评估其体内药代动力学、免疫原性以及靶向递送能力，尤其是在减少非靶向毒性、提升组织特异性方面的进展将极大推动其临床转化。
此外，利用LNP X系统递送CRISPR-Cas9基因编辑工具以实现病毒基因组的精确剪切和清除，或敲除HIV进入受体CCR5，都是未来值得探索的应用方向。总体来看，LNP X作为一种高效、低毒的mRNA递送平台，不仅为潜伏HIV的逆转治疗提供了新希望，也为其他难以转染的免疫细胞或疾病相关细胞的基因治疗奠定了技术基础。结合精准基因调控工具，mRNA-LNP技术必将在慢性传染病及免疫治疗领域掀起新的革命。
