艾滋病病毒（HIV）感染的治疗面临的最大挑战之一是病毒潜伏在免疫系统中的休眠CD4+ T细胞内，形成不可见的病毒储存库。这部分病毒并不进行活跃复制，因此无法被传统的抗逆转录病毒治疗（ART）清除，成为HIV治愈的最大障碍。近年来，科学家们致力于寻找有效策略，激活潜伏病毒，使其重新进入活跃复制阶段，进而通过免疫系统或其他疗法清除感染细胞，实现功能性治愈或彻底清除病毒。最新的mRNA递送技术为这一目标提供了创新工具，尤其是通过脂质纳米颗粒（LNP）载体，将编码特定蛋白的mRNA精准传递到难以转染的休眠T细胞中，进而实现高效逆转HIV潜伏感染。休眠CD4+ T细胞中的HIV病毒以整合到宿主基因组的静默形式存在，脱离ARV药物的作用监控。这种状态下，病毒的基因表达水平极低，甚至完全沉默，难以被免疫系统察觉。
传统的激活潜伏病毒药物，称为潜伏逆转剂（Latency Reversing Agents, LRAs），主要是小分子化合物，如组蛋白脱乙酰酶抑制剂（HDACi）等，能够一定程度上诱导病毒转录。但这些药物存在非特异性活化风险、免疫毒性和效果有限等问题，使其在临床上未能显著减少病毒储存库规模。为解决传统LRAs的不足，研究人员聚焦于开发病毒特异性的策略，例如利用HIV的转录激活蛋白Tat。Tat蛋白通过结合到HIV长末端重复序列（LTR）上，显著增强病毒转录的延伸阶段，从而推动病毒从潜伏状态向活跃复制转变。直接递送Tat蛋白具有潜力激活病毒，但受制于蛋白递送的效率、稳定性和细胞穿透能力限制。mRNA技术的兴起，为表达Tat蛋白提供了更灵活且高效的途径。
尤其是脂质纳米颗粒技术的飞速发展，使得mRNA能够被有效包裹并保护，避免降解，并实现针对特定细胞类型的递送。最新研究开发出的LNP X配方，通过置换传统LNP中的关键脂质组分，如将离子化脂质MC3替换为SM-102，结合使用天然存在的植物固醇β-谷甾醇，显著提升了mRNA递送效率和细胞摄取能力。LNP X在未激活的休眠CD4+ T细胞中实现了超过75%的转染效率，且无明显细胞毒性和非特异性T细胞活化现象，打破了CD4+ T细胞难以被非病毒载体转染的传统认知。这为潜伏病毒的精准激活提供了强大的技术支持。利用LNP X递送编码HIV Tat的mRNA，研究团队在休眠CD4+ T细胞中观察到了从转录起始、延长到剪接及转录完成各阶段的病毒RNA显著上调，甚至诱导病毒颗粒释放。相比传统的PMA/PHA化学诱导剂，Tat-LNP X展现出更强的转录激活效果，同时避免了全身性T细胞活化带来的免疫副作用，彰显了其作为潜伏逆转剂的优势。
此外，LNP X平台还能够协同递送复杂的核酸编辑组件，如CRISPR激活系统（CRISPRa）。通过携带dCas9-VP64融合蛋白mRNA、辅助转录激活因子MS2-p65-HSF1 mRNA，以及特异的导向RNA（gRNA）靶向HIV LTR区域，LNP X能够实现在未激活T细胞中的基因转录激活。这种高度特异的策略不仅能避免宿主基因无序激活风险，还为未来的定点基因调控及基因治疗奠定基础。针对HIV的CRISPRa-LNP X组合，在临床抑制ART患者的CD4+ T细胞中也表现出提升病毒转录的能力，虽转录激活效力略逊于Tat-LNP X，但具有高度的特异性和低细胞毒性。随着mRNA和纳米技术的不断进步，结合先进的基因编辑工具，未来可望实现联合治疗策略，通过有效激活潜伏病毒同时配合免疫增强及细胞杀伤策略，达到清除病毒储存库的目的。目前尽管Tat-LNP X和CRISPRa-LNP X均显著激活HIV转录，单一治疗尚未观察到明显的潜伏感染细胞消亡，提示还需联用凋亡诱导剂或免疫介导的清除手段。
此外，针对潜伏病毒状态的异质性，单一激活策略可能难以覆盖所有储存库组分，未来研究需深入解析不同病毒及宿主转录调控机制，优化递送载体及治疗组合，实现更全面、持久的病毒清除。安全性方面，目前体外和短期体外实验均未发现LNP X带来的显著毒性，但体内分布、免疫反应及持久性仍需系统评估。先前已开展的mRNA/LNP药物在人类的试验表明，一定剂量范围内该技术具备良好耐受性，期待未来通过靶向修饰及剂量优化，将其应用于HIV治愈临床试验中。综上，LNP X为基因治疗和病毒潜伏逆转提供了革命性的递送技术，突破了长期以来基因递送到休眠免疫细胞的瓶颈。凭借其非毒性、高效、病毒特异性，结合Tat蛋白和CRISPRa技术，成为研究和临床治疗HIV潜伏感染的强有力工具。未来整合mRNA递送、精准基因编辑与免疫调控，将加速实现HIV功能性治愈乃至彻底治愈的目标。
这一技术平台同样具备向其他难以转染的免疫细胞以及遗传性疾病的基因治疗领域推广的潜力，推动基因治疗新时代的到来。随着临床转化研究持续推进，人们对这种创新治疗方法的期待也日益高涨，有望为数百万HIV感染者带来新的希望和福音。
