艾滋病病毒（HIV）感染的根本挑战之一在于病毒在休眠的CD4+ T细胞中潜伏，形成难以清除的病毒库，即潜伏感染状态。尽管抗逆转录病毒治疗（ART）能有效抑制病毒复制，降低患者体内病毒载量，但无法根除这些潜伏感染细胞，导致停药后病毒重新激活，引发病毒载量反弹和病情复发。因此，消除潜伏病毒库成为攻克HIV治疗难题的“圣杯”。 近年来，基于mRNA的治疗策略展现出巨大潜力，尤其是利用纳米脂质体（Lipid Nanoparticles, LNP）作为递送工具，成功实现mRNA的安全高效转染。mRNA-LNP技术因其快速可开发性、良好的生物相容性及较低免疫原性，被广泛应用于疫苗和基因治疗领域。值得一提的是，新冠疫苗的成功研发展示了mRNA-LNP平台的实际应用潜力和转化速度，为HIV等慢性感染疾病的治疗提供了技术基础。
传统HIV潜伏逆转策略主要通过小分子激活潜伏病毒，即延迟病毒激活剂（Latency-Reversing Agents, LRAs），这类分子通常通过抑制组蛋白去乙酰化酶、激活蛋白激酶C途径等机制提升病毒基因转录活性。然而，实际临床试验中，这些小分子LRAs未能有效减少潜伏病毒库规模，部分原因是其非特异性活性以及难以克服病毒转录延伸及RNA剪接等下游转录障碍。同时，部分LRAs对免疫细胞有抑制作用，限制了免疫清除效果。 应对这一局限，新型核酸基LRAs，特别是mRNA编码的病毒激活因子，成为研究热点。HIV的转录激活蛋白Tat扮演关键角色，能结合病毒RNA的转激活响应元件（TAR），促进RNA聚合酶Ⅱ转录延伸，有效提升病毒转录效率。通过递送Tat mRNA至休眠CD4+ T细胞，理论上可激活潜伏病毒，重启病毒表达链条。
此前的研究虽显示Tat表达载体能逆转潜伏，但缺乏针对休眠T细胞高效、安全的递送系统，限制了其临床推广。 最新研究团队创造的LNP X纳米脂质体，采用SM-102离子性脂质替代传统DLin-MC3-DMA，辅以β-谷甾醇（β-sitosterol）替代普通胆固醇，从而显著提高了mRNA递送至非激活状态CD4+ T细胞的效率。在无细胞激活背景下，LNP X可实现超过75%的休眠T细胞转染，且不引发细胞毒性或免疫激活。这一发现突破了过去认为T细胞预激活是有效转染必要条件的传统观点。 研究利用LNP X负载Tat mRNA，在HIV感染者外周血CD4+ T细胞中体外实验表明，Tat-LNP X有效打破病毒转录多个阻碍，包括转录起始、延伸、剪接及RNA完成，诱导病毒多重剪接RNA及病毒释放，反应强烈且优于传统PMA/PHA强烈激活剂。同时，Tat-LNP X并未导致T细胞一般免疫激活，表明其具有良好的特异性和低副作用特征。
尽管如此，单一Tat介导的潜伏逆转尚未导致细胞内完整病毒DNA的减少，表明还需结合靶向杀伤策略，促进潜伏感染细胞清除。 此外，LNP X平台成功装载了较大且复杂的CRISPRa系统，包括失活Cas9融合转录激活因子dCas9-VP64、辅助激活因子MS2-p65-HSF1以及靶向序列特异性引导RNA（gRNA），实现靶向激活内源基因表达。例如，以促活CD25（IL2RA）基因为例，LNP X递送CRISPRa显著提升其表达，而不引发细胞广泛激活。将CRISPRa引导序列定向至HIV LTR区域，亦实现病毒转录水平的特异激活，尽管激活程度稍逊于Tat mRNA，仍展示了强大潜力。这种高度特异的转录激活策略，有望避免传统LRAs的非特异性毒副反应，保持免疫微环境稳定。 作用机制研究显示，LNP X显著提升mRNA递送后胞质内的蛋白表达水平，部分原因是其与T细胞表面高度结合，提升内吞吸收率。
同时，该配方并未显著提升内涵体逃逸效率，提示其优效性主要体现在胞质mRNA释放后的翻译效率提升。这有助推动更有效的核酸治疗设计理念，即不仅关注载体进入细胞，更需优化胞质内活性。 该技术在实验室免疫细胞及人体样本中的反复验证，为未来临床转化奠定坚实基础。未来研究应重点评估体内分布、免疫原性及安全性，提升对T细胞亚群的靶向递送效率，设计配合免疫细胞激活或杀伤的协同治疗方案。此外，对潜伏病毒库全景覆盖及长期疗效的体内模型验证亦不可或缺，为实现HIV功能性治愈贡献力量。 这项研究不仅推动HIV治疗技术革新，也为诸如癌症免疫疗法、遗传性疾病治疗等领域提供mRNA递送的典范。
LNP X技术体现了纳米技术、生物工程与分子医学的融合前沿，彰显了精准靶向、高效安全基因编辑及表达的未来趋势。期待在不远的将来，mRNA-LNP平台在抗病毒、基因调控领域的广泛临床应用，真正造福全球患者。 总结而言，针对休眠CD4+ T细胞的高效mRNA递送技术，如LNP X，突破了长期存在的细胞转染瓶颈，引领HIV潜伏逆转策略进入新纪元。结合Tat蛋白和CRISPRa系统的灵活应用，为精准激活潜伏病毒、促进病毒根除铺平道路。持续的技术优化与临床研究将加速基于mRNA的创新疗法实现，从根本上改变HIV及其它难治疾病的治疗格局。
