艾滋病毒（HIV）潜伏感染是当前HIV治愈研究中最大的障碍之一。尽管抗逆转录病毒治疗（ART）能够有效抑制病毒复制，降低患者病情恶化风险，但病毒潜伏在静息CD4+ T细胞中的整合DNA使得病毒得以逃避免疫系统及药物的监控和攻击。科学研究表明，这些潜伏的病毒整合体保持处于转录沉默状态，无法被常规治疗激活，导致患者在停药后病毒迅速反弹。解决潜伏病毒激活的问题，成为“冲击并杀灭”（shock and kill）策略的核心。因此，开发能够高效递送激活因子的基因治疗载体成为未来治疗的关键一步。 近年来，mRNA与脂质纳米颗粒（LNP）技术的突破为基因治疗领域带来了革命性进展。
mRNA作为治疗工具本身具有高度可设计性和表达效率，而LNP则为mRNA的细胞递送提供了安全且高效的载体。借助这一技术，不仅在COVID-19疫苗研发中获得了巨大成功，也为治疗难以转染的细胞类型，如静息T细胞，提供了可能。 静息CD4+ T细胞因其低代谢和细胞活化状态，传统的基因递送方法往往转染效率极低，附带较大细胞毒性或激活风险。对此，研究团队开发出一种新型LNP配方，称为LNP X，该配方采用了SM-102离子化脂质并用β-谷甾醇替代传统胆固醇，显著增加了与细胞的结合能力和mRNA的翻译效率，而并非仅仅依赖于增强胞内逃逸机制。实验显示，LNP X可以在无须预激活的静息CD4+ T细胞上实现高达75%以上的转染率，同时没有明显细胞毒性和非特异激活，标志着纳米递送技术在静息T细胞中的重大突破。 为了实现HIV潜伏病毒的激活，研究人员利用LNP X递送编码HIV转录激活蛋白Tat的mRNA。
Tat蛋白通过结合病毒LTR启动子上的反转录响应元件TAR，促进病毒转录的延伸和完成，从而显著提高病毒基因表达。实验在体外J-Lat细胞系和取自接受ART治疗的HIV感染者的外周血CD4+ T细胞中均展示出Tat-LNP X强大的激活潜力。Tat-LNP X不仅促进了HIV RNA转录起始，更有效克服了之前阻碍转录延伸及剪接的疫区，诱导了多重剪接的Tat-Rev转录本表达，甚至促进了病毒RNA释放。然而，尽管显示出强效激活，单一Tat-LNP X处理并未导致潜伏病毒携带细胞数量的明显减少，提示未来需结合诱导死亡或免疫清除策略以实现延缓或根除。 除了Tat蛋白mRNA，LNP X也成功封装并递送了体积更大且结构复杂的CRISPR干预装置，特别是无核酸切割功能的dCas9-VP64融合蛋白与辅助激活因子MS2-p65-HSF1，再结合针对HIV LTR的导向RNA（gRNA），实现对病毒潜伏基因组的精准激活。实验以促CD25（IL2RA基因）过表达的模型系统说明CRISPR激活系统有效递送和功能显著提升，带来了持续且特异的转录激活效果。
继而，将其用于抑制病毒潜伏LTR区域，实现了不同水平HIV RNA上调，尽管激活强度略逊于Tat-LNP X，但展现了诱导潜伏病毒转录的独特机制及高特异性，降低了非靶细胞激活风险。 该mRNA-LNP递送平台的最大优势在于其非病毒载体性质，降低了免疫原性和潜在基因插入风险，同时以可控剂量和多功能递送实现疗法设计多样化。LNP X的开发不仅推动了HIV潜伏逆转领域的发展，也为未来基于mRNA的基因激活疗法提供了基础，可能应用于免疫调节、肿瘤治疗及遗传疾病修复等多重方向。 然而，要实现临床应用，仍面临多项挑战。首先，需要深入研究LNP X在体内的分布和药代动力学，尤其是在人体内是否能高效靶向静息T细胞而非其他免疫细胞。其次，长期安全性和潜在免疫激活效应需严格评估。
此外，虽然体外表现优异，体内复杂的免疫微环境与病毒异质性或带来转染和激活的差异，因此，联合其他免疫介入或细胞凋亡诱导剂可能成为必要手段。 研究团队建议未来方向应着重于优化LNP X配方，提升针对T细胞亚群的特异性，通过添加分子靶向配体实现精准递送，并结合功能性免疫治疗以清除经过激活的潜伏病毒携带细胞。此外，单细胞高通量技术的引入将有助于评估激活均一性与安全性，为个性化治疗奠定基础。伴随着mRNA药物的迅速进展和纳米技术的迭代升级，针对潜伏HIV逆转的基因治疗或将开启由实验室向临床转化的全新篇章。 综上所述，LNP X介导的mRNA递送策略不仅成功突破了静息CD4+ T细胞的转染难题，实现了高效且低毒性的基因激活效果，还为HIV潜伏病毒的精准逆转提供了全新的技术支持。Tat蛋白mRNA和CRISPRa系统的有效递送进一步证明了这一路径的可行性和广泛应用潜力。
未来结合更强力的免疫清除策略，或能最终解决藏匿体内的病毒库，实现HIV治愈的长远愿景。随着相关技术逐步完善与安全性验证，mRNA-LNP基因治疗有望成为抗击艾滋病毒感染的重要战场，为全球数百万感染者带来福音。
