艾滋病毒（HIV）感染的根本挑战之一在于病毒能够潜伏于静息状态的CD4+ T细胞中，形成难以清除的病毒库。这些潜伏病毒即使在抑制性抗逆转录病毒治疗（ART）下仍然存在，一旦抗病毒治疗停止，病毒可以迅速反弹并重建感染。科学界长期致力于寻找逆转病毒潜伏状态的方法，从而实现根治。近期，一项突破性的研究聚焦于利用高效的mRNA递送系统，唤醒静息T细胞内沉默的HIV，开辟了一条全新的治疗思路。 传统的小分子潜伏逆转剂（LRAs）通过激活不同的细胞信号通路来尝试促进HIV基因转录，但这些方法往往毒性较大，缺乏针对性，且难以克服转录过程中的多个阻滞点。更重要的是，许多LRAs只能激活转录起始阶段，无法高效促进转录延伸、拼接及完成，因而无法达到有效清除潜伏病毒的效果。
此外，这类药物可能抑制免疫细胞功能，阻碍清除被激活的病毒感染细胞，使其临床应用受到限制。 针对上述挑战，研究团队提出利用mRNA结合脂质纳米颗粒（LNP）技术，直接将编码HIV激活蛋白的mRNA递送到静息CD4+ T细胞中，从病毒内部激活潜伏状态。LNP本身因其能够保护mRNA免受降解，促进细胞摄取并实现高效的细胞内释放，已被广泛应用于疫苗及基因治疗领域。然而，静息T细胞因其内在的生理状态，世界上公认的难以转染，限制了基因技术的实际应用。 为突破这一技术瓶颈，团队开发了创新的LNP配方，称为LNP X。该配方以SM-102离子化脂质与β-谷甾醇相结合，显著提升了纳米颗粒与静息CD4+ T细胞的结合及其胞质内mRNA递送效率。
实验数据显示，LNP X能够在无任何预激活条件下，将报告基因mRNA成功递送并表达超过75%的初级静息CD4+ T细胞，且细胞存活率及活性标志物未见明显异常变化。这一突破性进展为基因递送技术进军难转染细胞领域奠定了基础。 紧接着，研究团队将编码HIV Tat蛋白的mRNA封装入LNP X中。Tat蛋白作为病毒转录激活因子，能够与HIV基因组中的转录响应元件（TAR）结合，促进RNA聚合酶II的转录延伸，从而克服转录停顿和阻滞。实验结果显示，Tat mRNA-LNP X在静息CD4+ T细胞中有效诱导了HIV全程转录环节，包括转录起始、延长、拼接与转录完成，显著提升病毒RNA表达水平，远超传统激活试剂如PMA/PHA激活所达成的效果。更关键的是，Tat mRNA-LNP X激活HIV转录而未引发T细胞的非特异性激活，避免潜在的免疫系统过度反应和细胞毒性，提高了安全性。
为了进一步提高激活的特异性与效率，团队还尝试将基于CRISPR激活系统（CRISPRa）的基因编辑工具通过LNP X递送到静息T细胞。CRISPRa技术利用无切割活性的Cas9融合转录激活因子，指导至HIV长端重复序列（LTR）启动子区域，提高潜伏病毒的转录活性。通过共同封装dCas9-VP64、MS2-p65-HSF1激活复合物mRNA及特定导向RNA，LNP X成功在静息CD4+ T细胞中激活了HIV基因表达，且不引起细胞激活及明显毒性。虽然CRISPRa相较Tat诱导的转录激活效应略低，但其高度的特异性为未来打造精准高效、安全性更佳的治疗策略提供了可能。 研究还表明，LNP X不仅能高效递送小分子编码mRNA，也具备共递送大分子复杂RNA的能力，展现了其多功能的递送潜力。此外，LNP X对多种免疫细胞亚群均有较高的内吞能力，尤其以CD4+ T细胞为主，提示其在免疫细胞基因治疗领域应用的广泛性。
尽管Tat mRNA-LNP X能够显著提高HIV转录并促进病毒RNA释放，但实验中并未观察到潜伏病毒载量的显著下降。这一现象可能与潜伏感染细胞表达的抗凋亡蛋白如BCL-2家族成员及BIRC5相关，这些蛋白维持感染细胞的存活，阻碍病毒相关细胞死亡或免疫清除。因此，未来治疗策略或需结合促凋亡药物、免疫增强剂或免疫细胞疗法，配合潜伏逆转，共同实现病毒的根除。 此外，未来研究需进一步评估LNP X在体内的分布、半衰期及免疫原性，以及探索通过特异性配体修饰，实现纳米颗粒的靶向递送，最大限度地减少非靶向组织的递送，提升安全性和治疗效率。同时，长期影响包括T细胞功能、基因表达谱及潜在免疫反应也需深入探讨，以确保临床应用的安全稳妥。 总体而言，LNP X基因递送技术为HIV潜伏逆转开辟了新途径，其高效、低毒性、可编码多样性RNA的特点使其在基因治疗领域展现出丰厚的应用前景。
该策略兼具mRNA技术灵活性与纳米递送载体优势，能够精准激活潜伏病毒而不干扰宿主免疫功能，为实现HIV功能性治愈提供了有力工具。 此项研究的成功不仅提升了对HIV潜伏机制的理解，也推动了基因治疗技术在慢性感染和免疫疾病中的应用。随着mRNA和纳米材料领域的不断发展，结合个性化医疗理念，未来或可制定更为精准、安全且高效的组合疗法，彻底改变艾滋病患者的治疗格局。 综上所述，高效mRNA递送系统LNP X为静息CD4+ T细胞潜伏病毒的激活提供了创新方案。其不仅解决了传统mRNA递送面临的技术障碍，同时也实现了对病毒转录多阶段阻滞的克服。结合CRISPRa激活技术的靶向精准性，此策略为HIV根除或功能性治愈研究赋能。
随着后续临床前优化及临床试验的展开，未来在抗HIV治疗、免疫基因治疗等领域必将发挥日益重要的作用。
